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Wysłany: Czw 15:41, 03 Mar 2011 Temat postu: MBT footwear 不同基因 |
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不同基因型戊型肝炎病毒重组抗原p166用于抗体检测的价值
我们对2003年6月—20o4年3月的26株铜绿假单胞菌进行岫基因型分布研究。用V1"I~-32自动微生物系统鉴定菌种和测定3种氨基糖苷类抗生素敏感性,按NCCLS21104年版要求进行。PeR法检测9种岫基因:∞c(3).I、∞c(3).1I、口口c(3).HI、口口c(3).IV、口口c(6).I、口口c(6).1I、印JI(3).Ⅵ、洲(3).I、am().I。PCR试剂盒由无锡市克隆遗传技术研究所提供。各种靶基因PeR扩增体系均为:每反应体系Pl、作者单位:214(102南京医科大学附属无锡第一医院(蔡培泉,王春新);无锡市克隆遗传技术研究所(糜祖煌)通讯作者:王春新。∞iI:bacteri习∞1@163.㈨,电话:cI51蝴8.7331P2引物各0.5邮L,KCI10mmol/L,MBT footwear,(m)2so,8mmol/L,MgCl22mmol/L,Tris-HCl(pH9.0)10mmd/L,NP40—0.5%,BSA0.02%(质量浓度),DNAp0l1U,ray ban occhiali。总反应体积20(模板液5)。热循环参数均为:93℃预变性2win,然后93℃30s一55℃30s一72℃60s,循环35周期,最后72℃延长5rain。产物经2%琼脂糖凝胶电泳,出现与阳性对照分子相当的目的条带判为阳性,并摄像保存。扩增的岫基因PeR产物经纯化后用ABI自动DNA序列分析仪进行序列测定,所测序列经BIASr程序同源性分析。26株铜绿假单胞菌中已有l5株对庆大霉素、妥布霉素、奈替米星等氨基糖苷类药物耐药,耐药率57.7%,明显高于国内其他地区报道,耐药菌株大多对2种以上氨基糖苷类药物耐药,表明本组铜绿假单胞菌对氨基糖苷类药物已呈多重耐药。细菌对氨基糖苷类药物耐药机制主要有两种,一为产,二为细菌的药物作用靶位16SA基因突变,以前者为常见。岫可分为乙酰转移酶(ACC)、磷酸转移酶(APH)、核苷转移酶(AN1’)3大类30余种。岫基因型的分布带有明显的地区性和菌株差异,革兰阴性菌主要产生∞c(3).I、∞c(3).1I、口口c(3).HI、口口c(3).IV、口口c(6).I、口口c(6).1I、am().I、am().I、(3).Ⅵ等9种岫基因,国外学者已从耐氨基糖苷类药物的铜绿假单胞菌中检出口口c(3).I、口口c(3).HI、口口c(6).I、∞c(6).1I等4种岫基因,但不同地区检出状况不同。本组铜绿假单胞菌中l2株检出氨基糖苷类修饰酶基因,检出率为46.2%。9种基因由高到低的检出率分别为:∞c(6).I(38.5%)、∞c(6).Ⅱ(15.4%)、am().I(15.4%)、洲(3).I(7.7%)、∞c(3).Ⅱ(3.8%),未检出口口c(3).I、口口c(3).HI、口口c(3).IV和qPJI(3).Ⅵ,MAC Cosmetics UK,岫基因型分布与国外报道结果明显不同。1983年分离到的大多数耐药菌仅对某一种氨基糖苷类抗生素产生耐药,而最近的调查发现大多数的耐药菌含有多重耐药机制,其中最多的含有6种岫。本组研究中有5株含两种以上岫基因,有2株含有4种岫,nike shoes sale。另外有1株表型为氨基糖苷类药物敏感但检出岫基因,可能与基因的表达程度、不同抗生素的抗菌活性以及对酶的稳定性差异有关。8株表型为氨基糖苷类药物耐药,但9种基因检测为阴性,可能存在其他修饰酶基因或耐药机制。本研究∞c(3).II基因(AY553612)和am().I基因(AY553611)序列已成功注册GenB~(网址:http://~.nebi.nhn.nil】.gov/Nu·el~ae)。(收祷日期~2005-10-27)
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